| Título: | CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA DE LA TIMIDILATO CINASA DEL VIRUS DEL SÍNDROME DE LA MANCHA BLANCA Y SU INTERACCIÓN CON ANÁLOGOS NUCLEOSÍDICOS |
| Autores: | EDUARDO GUEVARA HERNANDEZ |
| Fecha: | 2014-06 |
| Publicador: | CIAD |
| Fuente: |
 |
| Tipo: |
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| Tema: |
info:eu-repo/classification/Bioquímica de proteinas. Palabras clave: Virus de la mancha blanca, cinasas, nucleótidos, replicación viral, timidina monofosfato, L. vannamei./Tecnología de alimentos info:eu-repo/classification/cti/2 |
| Descripción: | "En este trabajo se sobreexpresó y purificó el dominio de la timidilato cinasa del gen TK-TMK (ORF 454) del WSSV y se demostró que es activo de manera independiente. Además, se determinó cualitativamente la formación de desoxitimidina difosfato (dTDP) y dTTP, por lo que el dominio de TMK del ORF 454 del WSSV, es una cinasa bifuncional ya que presenta actividad catalítica de nucleósido mono y difosfato cinasa. Las constantes cinéticas determinadas para los sustratos naturales de la enzima, sugieren que la eficiencia de formación de dTDP por la cinasa viral, es de las más elevadas hasta ahora reportadas para las TMKs de otros organismos. Se determinaron las constantes de afinidad de los sustratos analizadas cinéticamente y se compararon con análogos nucleosídicos. La afinidad del análogo nucleosídico dideoxitimidina monofosfato (d4TMP), es similar a la afinidad por el sustrato natural. Estos resultados permiten establecer posibles estrategias de tratamiento, mediante el uso de fármacos que son utilizados para combatir de enfermedades virales. En los modelos estructurales determinados in silico, se demuestra que la TMKwssv presenta el plegado característico α/β de las nucleótido cinasas, así como los lazos que conforman el sitio activo de las TMKs reportadas en la base de datos de estructura de proteínas (PDB). Aunque aún no se ha demostrado que el gen TK-TMK del WSSV es separado proteolíticamente in vivo, en dos dominios independientes durante la infección viral, en el presente trabajo se ha demostrado que la separación de ambos dominios es factible bioquímica y estructuralmente y que el producto del gen bifuncional del ORF 454 del WSSV, puede realizar las tres fosforilaciones necesarias para la formación de dTTP. Palabras clave: Virus de la mancha blanca, cinasas, nucleótidos, replicación viral, timidina monofosfato, L. vannamei." |
| Idioma: | spa |
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