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Título: Identificación de transcritos del subcomplejo sarcoglicano-sarcospan (SG-SSPN) y localización de la proteína sarcospan en el tejido adiposo parametrial de rata
Autores: Hernández Stengele, Gabriel
Fecha: 2004-08-13
Publicador: CIRIA
Fuente:
Tipo: Electronic Thesis or Dissertation
Tesis
Tema: Biología con área en Biotecnología
Descripción: El subcomplejo sarcoglicano-sarcospan (SG-SSPN), el cual forma parte del complejo de proteínas asociadas a la distrofina (DGC), se encuentra compuesto por un grupo de glicoproteínas transmembranales denominadas sarcoglicanos (SGs; subunidades y ) y por la tetraspanina asociada de nombre sarcospan (SSPN). La expresión de los SGs y se encuentra restringida al músculo estriado, mientras que los SGs y y SSPN además de expresarse en el músculo esquelético, cardiaco y liso se expresan entre otros tejidos no musculares. Las mutaciones en los genes que codifican para los SGs y se asocian a distrofias musculares autosómicas recesivas de cintura, y las mutaciones en SG se vinculan a la patología neuromuscular, distonia mioclónica. Con respecto a la subunidad y a la proteína SSPN, a la fecha no se han reportado mutaciones asociadas a alguna enfermedad o miopatía. Sin embargo, ratones transgénicos "knock-out" sspn -/- presentan un incremento aparente en el tejido adiposo. En vista de que la correcta localización de sarcospan en la membrana depende del ensamblaje y transporte del complejo de sarcoglicanos, en el presente trabajo se determinó la expresión del subcomplejo SG-SSPN en el tejido adiposo parametrial de la rata. Los resultados indican la presencia a nivel de transcrito de todos los componentes del subcomplejo SG-SSPN ( y SG y sspn) en el tejido adiposo. Hasta donde se tiene conocimiento, este es el primer trabajo que define la existencia del transcrito de SG en un tejido no muscular. Considerando que a la fecha no se ha reportado la secuencia del gen de sarcospan en rata, el análisis y alto porcentaje de homología determinado para la secuencia obtenida del transcrito así como la secuencia de aminoácidos correspondiente con respecto a las secuencias reportadas de humano y de ratón, establece tentativamente que el gen sspn de la rata se localiza en el locus 4q44. Mediante los ensayos de inmunofluorescencia en el mismo tejido se detectó la presencia de la proteína sarcospan en la membrana de los adipocitos de manera similar a la ubicación subcelular reportada en otras células musculares y no musculares. Palabras clave: sarcospan, sarcoglicano(s), SG-SSPN, tejido adiposo, adipocito, rata. The sarcoglycan-sarcospan subcomplex (SG-SSPN) within the dystrophin-glycoprotein complex (DGC) consists of a group of transmembranal glycoproteins sarcoglycans (SG) and an associated tetraspan-like protein named sarcospan (SSPN). and SG expression is restricted to striated muscle, while and SGs and SSPN have a more generalized expression, which includes muscle tissues and non-muscle tissues. The absence or markedly reduced expression of the sarcoglycan complex due to mutation of any of the sarcoglycan genes ( ) lead to limb-girdle muscular dystrophies type 2C-F. Mutations in SG are related with myoclonus-dystonia syndrome, a neuromuscular pathology associated with psiquiatric manifestations. However, no mutations in SG and SSPN had been reported in association with disease or myopathologies. Transgenic knockout mice sspn -/- do not exhibit a dystrophic phenotype; nevertheless this animals are characterized by a detectable increase in fat pad deposits. Since the membrane targeting and stabilization of sarcospan is probably mediated by the sarcoglycan complex, in this work we assessed the expression of transcripts of the SG-SSPN subcomplex in rat white adipose tissue and we localized the protein sspn in adipocytes. The results of this work shows, the transcript expression of -SGs and sspn in white adipose tissue. In the case of SG to our best knowledge this is the first time that its transcript is detected in a non-muscular tissue. Considering that the sequence of the rat sarcospan gene has not yet been reported the high homology determined for the amplified transcript and corresponding peptide in regard to the human and murine matching regions establishes also for the first time that the gen sspn of the rat is localized in the locus 4q44. Immunofluorescence assays realized in the same tissue, indicated an evident expression of sspn protein in the membrane of the adipocytes similarly to what has been reported in other cell types. Keywords: sarcospan, sarcoglycan(s), SG-SSPN, adipose tissue, adipocyte, rat.
Idioma: Español