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En el presente trabajo se ha pretendido realizar un estudio en profundidad de la función
de la enzima arginasa en el modelo experimental Leishmania-ratón. Para ello hemos
utilizado dos cepas murinas que representan el paradigma de susceptibilidad (BALB/c) y
resistencia (C57BL/6) al desarrollo de la infección por estos parásitos.
Basándonos en este objetivo fundamental, en primer lugar se llevaron a cabo una serie
de estudios in vitro, en macrófagos diferenciados de la médula ósea y procedentes de
ratones de ambas cepas. Una vez maduros, los macrófagos fueron sometidos a diferentes
estados de activación mediante citoquinas de tipo Th1 y Th2, al objeto de dirigir de forma
diferencial el metabolismo del aminoácido L-arginina hacia la inducción de la iNOS o
arginasa, respectivamente.
Los datos mostraron que de forma constitutiva, los macrófagos BALB/c presentan unos
mayores niveles de expresión de arginasa que los C57BL/6, los cuales, por el contrario,
produjeron mayor cantidad de nitritos por activación de la iNOS. Estos resultados se
correlacionan con una mayor permisividad a la infección en la cepa susceptible que en la
resistente en todos los ensayos.
Cuando los macrófagos fueron activados con citoquinas tipo Th2, inductoras de
arginasa, y posteriormente infectadas tanto con L. major como L. infantum, ambas cepas
respondieron con un alto incremento de la proliferación parasitaria de forma dosisdependiente,
siendo este aumento proporcional al de la actividad enzimática. De todas las
citoquinas, la IL-4 fue la que proporcionó mayores niveles de inducción de arginasa y de
replicación de los parásitos.
Mediante la técnica inmunológica de Western Blotting se confirmó que la isoforma de
arginasa inducida en macrófagos infectados y tratados con IL-4, IL-10 y TGF- ß es la
arginasa I. El análisis semicuantitativo de las bandas reflejó, una vez más, la mayor
eficacia de la IL-4 para la inducción de esta enzima.
Nuestra hipótesis fundamental de que las poliaminas generadas por la actividad arginasa |
